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可以区分B细胞和T细胞的新型荧光探针

人体血液包含几种不同的成分,包括血浆,红细胞(RBC),白细胞(WBC)和血小板。其中,白细胞被分为许多亚类,每个亚类具有独特的功能和特征,例如淋巴细胞,单核细胞,嗜中性粒细胞等。淋巴细胞进一步细分为T淋巴细胞,B淋巴细胞和NK细胞。在进行免疫学领域的研究中,区分和分离这些细胞的不同类型非常重要。

通常通过流式细胞术和荧光激活细胞分选(FACS)来区分不同的免疫细胞类型,这可以根据它们的大小,粒度和荧光来识别不同的细胞群。虽然单独的大小和粒度无法区分具有相似物理参数的细胞,但不同类型的免疫细胞在细胞表面显示出不同的免疫受体组合。例如,T淋巴细胞和B淋巴细胞分别表达CD3和CD19。因此,荧光鉴定免疫细胞依赖于使用针对不同受体的多种抗体对细胞染色。长期以来一直认为,不使用这些抗体就不可能区分不同的免疫细胞类型。

但是,韩国基础科学研究所的自组装和复杂性中心的科学家所做的新颖突破性研究可能刚刚改变了这一情况。研究人员采用了面向多样性的荧光文库方法(DOFLA),利用与小鼠脾脏分离的B和T淋巴细胞筛选了10,000多种不同的荧光分子。由此,他们设法发现了一种新的荧光探针,该探针可以区分B淋巴细胞而不是T淋巴细胞,而无需细胞受体靶向抗体。

研究人员称这种新探针CDgB为B淋巴细胞的绿色代表化合物。CDgB是一种亲脂性分子,包含连接至烃链的荧光成分。由于CDgB既包含极性荧光基团又包含烃尾基,这意味着游离的未结合CDgB染料分子在溶液中形成类似于胶束的聚集体,并显示出低水平的背景荧光。但是,当它们附着在细胞表面时,聚集体解离并导致荧光信号出现尖峰。另外,染料的亲脂性意味着染料不与蛋白质靶结合,而是直接定位在脂质膜结构上。研究人员称,这是“报道这种细胞分化机制的第一个例子”。

CDgB能够选择性地将B淋巴细胞的细胞膜靶向于T淋巴细胞或NK细胞。研究人员试图通过测试具有4至20个碳原子的各种烃链长度的分子的不同衍生物,来优化CDgB的选择性。发现具有14至18个碳的CDgB衍生物显示出对B淋巴细胞的最高选择性,而C18显示出最佳结果。当碳长度增加到20以上时,通过荧光来区分细胞变得更加困难。碳长度对选择性至关重要,这一事实表明该机制取决于B淋巴细胞和T淋巴细胞之间膜结构的差异。

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