免疫 CRISPR 检测可以帮助早期诊断肾移植排斥反应

患者接受肾移植时，医生会通过多种方式(包括活组织检查)仔细监测他们是否有排斥迹象。但是，此过程是侵入性的，只能在后期发现问题。现在，分析化学的研究人员已经开发出一种基于 CRISPR 的检测方法，可以灵敏且非侵入性地检测尿液中急性肾排斥反应的生物标志物。有朝一日，这可能有助于在不进行活检的情况下更早地诊断排斥反应。

肾移植受者必须终生服用免疫抑制药物，以帮助防止免疫系统攻击外来器官。然而，肾脏排斥反应仍然可能发生，特别是在移植后的最初几个月，这被称为急性排斥反应。体征包括血清肌酐水平升高以及肾痛和发烧等症状。

目前，明确诊断它的唯一方法是通过活检，但这种程序只能在相对较晚的阶段发现问题。能够在早期阶段灵敏且无创地诊断肾脏排斥反应将使医生能够更快地开始抗排斥药物治疗。研究人员此前发现，肾移植患者尿液中高水平的细胞因子蛋白 CXCL9是排斥反应的早期预警信号。但目前测量 CXCL9 的方法(一种酶联免疫吸附试验，或 ELISA)在尿液中效果不佳，限制了其灵敏度。因此，Jonathan Dordick 及其同事希望开发一种更灵敏的技术，用于通过尿液非侵入性诊断急性肾排斥反应。

研究人员将他们的检测方法基于 CRISPR/Cas12a 基因编辑技术。在 CXCL9 蛋白存在的情况下，CRISPR/Cas12a 酶切割探针以产生荧光信号。研究人员通过附加聚集大量 CRISPR/Cas12a 分子的 DNA 条形码来增强荧光信号，随后与识别 CXCL9 的抗体结合。

重要的是，与其他基于 CRISPR 的检测方法不同，不需要 PCR 扩增，这使得该方法更容易适应可在医生办公室甚至患者家中使用的设备。当对11 名肾移植患者的尿液样本进行测试时，新系统准确地测量了 CXCL9 水平，其值与 ELISA 非常相似。然而，研究人员说，由于免疫 CRISPR 系统的灵敏度是 ELISA 的大约 7 倍，它可能能够在非常早期的阶段检测到肾移植排斥反应。

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