【cck8实验原理】CCK-8(Cell Counting Kit-8)是一种广泛应用于细胞活力检测的试剂,其原理基于WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸基)-2H-四唑单钠盐)在电子载体1-Methoxy PMS的存在下,被细胞内的脱氢酶还原为水溶性的橙黄色甲臜(Formazan)。这一过程与细胞活性密切相关,因此可用于评估细胞的增殖能力和存活率。
CCK-8实验具有操作简便、灵敏度高、重复性好等优点,常用于药物筛选、毒性测试、细胞增殖研究等领域。以下是对CCK-8实验原理的总结和相关参数对比:
CCK-8实验原理总结
CCK-8试剂的核心成分是WST-8,它本身不具有颜色,但在细胞内脱氢酶的作用下会被还原成具有颜色的甲臜。这个反应的强度与活细胞数量成正比,因此可以通过分光光度计测定450 nm处的吸光度(OD值),从而间接反映细胞的活性。
该方法的优势在于:
- 不需要裂解细胞,可实现活细胞的连续监测;
- 无需放射性同位素,安全性高;
- 适用于多种细胞类型,适用范围广。
CCK-8实验原理关键参数表
| 项目 | 内容 |
| 实验原理 | WST-8在脱氢酶作用下被还原为甲臜,通过吸光度测定细胞活性 |
| 主要成分 | WST-8 + 1-Methoxy PMS |
| 检测波长 | 450 nm(OD值) |
| 检测对象 | 活细胞数量与活性 |
| 优点 | 高灵敏度、无毒、可重复使用 |
| 缺点 | 受细胞代谢状态影响较大 |
| 应用领域 | 药物筛选、细胞毒性分析、增殖实验等 |
通过以上总结和表格,可以清晰了解CCK-8实验的基本原理及其在实际应用中的特点。此方法因其便捷性和准确性,已成为细胞生物学研究中不可或缺的工具之一。


